Влияние фосфолипидных частиц разного размера на уровень фосфолипидов и апопротеина A1 в субфракциях липопротеидов высокой плотности при инкубации с плазмой крови in vitro

Аннотация

Цель. В последние годы показано, что способность липопротеидов высокой плотности (ЛВП) выводить из клеток холестерин зависит не только от их концентрации, но и от свойств, которые часто нарушены при атеросклерозе по еще не выясненным механизмам. Одним из способов повышения активности ЛВП считают обогащение их фосфолипидами (ФЛ). Исследовали влияние инкубации плазмы с разработанной ранее эмульсией ФЛ частиц диаметром менее 30 нм на субфракции ЛВП в сравнении действием более крупных липосом.
Методы. Эмульсию ультрамалых частиц (менее 30 нм), полученную из соевого фосфатидилхолина по разработанному ранее способу, и эмульсию с размером частиц 100–150 нм инкубировали с плазмой крови человека, после чего выделяли ультрацентрифугированием ЛВП2, ЛВП3 и оставшуюся после флотации липопротеидов – де липопротеидизированную плазму, содержавшую пре-β-ЛВП, и определяли в них уровни ФЛ и апопротеина А1.
Результаты. Показана фосфолипидация всех субфракций, наиболее выраженная при инкубации плазмы с ультрамалыми ФЛ частицами, с диаметром менее 30 нм. Максимальными были изменения содержания ФЛ и апоА1 в ЛВП2 – возрастание в среднем в 3–6 раз. В ЛВП3 и де липопротеидизированной плазме изменения составляли 30–50%, причем, в отличие от ФЛ, уровень в них апоА1 снижался, пропорционально концентрации внесённых ФЛ наночастиц. При этом впервые был показан противоположный характер изменений уровней апоА1 в ЛВП2 по сравнению с двумя другими фракциями. Такое перераспределение белка можно объяснить снижением их плотности и увеличением размера при обогащении фосфолипидами, что приводит к флотации с ЛВП2. Это подтверждается электрофорезом плазмы в агарозном геле. Отношение ФЛ/апоА1, считающееся существенным для холестерин-акцепторной активности, повысилось во всех фракциях ЛВП, особенно после инкубации с ультрамалыми частицами – в 2 раза.
Заключение. Инкубация плазмы с ультрамалыми ФЛ частицами менее 30 нм приводит к высокой степени фосфолипидации фракций ЛВП, с частичным перераспределением апо А1 к ЛВП2. Это, как показано рядом авторов, должно приводить к повышению выведения клеточного холестерина. Результаты свидетельствуют о перспективности использования таких наносистем в комплексной терапии сердечно-сосудистых заболеваний – с целью повышения активности ЛВП и обратного транспорта холестерина и предотвращения прогрессирования поражения сосудов.